① 生物翻譯
材料和方法 基因股票和成長情況 有一例外, 所有基因股票被描述在本文里是 哥倫比亞背景。T-DNA 插入SALK_035860 被獲得了 從Arabidopsis 生物資源中心。插入 FLAG_173C12 被獲得了從FST 項目和被描繪了 在Ws 基因背景中。植物homozygous 為這些插入是 由PCR 辨認使用等位基因具體底漆。種子增長 Metromix 200 (Scotts) 並且離開在4.C 冷室2 天在調動之前 對成長分庭。植物年齡被計量從時間種子是 轉移到成長分庭。為顯形分析, 植物是 增長在96-well 艙內甲板在連續的熒光燈之下(100 E/minute/m2; Sylvania VHO) 在22.C 。離開軸心的trichomes 被計分了2 幾星期在種植以stereomicroscope 以後。開花的時間代表 第一開放花的出現。
核糖核酸污點 總核糖核酸被隔絕了使用Trizol (Invitrogen) 從植物射擊尖頂 增長在短天之下適應(10 個小時light:14 小時黑暗) 在22.C 。 整體幼木(包括盾狀體) 被使用了為8 對14 天 幼木、盾狀體和葉子1 和2 從植物被去除了 收獲在18-21 天在種植以後(dap), 和盾狀體之間和 葉子1-4 從植物被去除了被收獲在23-28 之間dap 。葉子的數字當前在射擊尖頂由比較確定了 與成長曲線由解剖引起射擊尖頂增長在之下 同樣SD 情況。測量SPL3mRNA,
20總核糖核酸g 跑了 在1.2% agarose 膠凝體, 轉移到Hybond N+ 尼龍膜 (Amersham Pharmacia), 和交互相聯在紫外光之下。雜交 執行了在68.C 在PerfectHyb 加上緩沖(斯格碼) 。
從SPL3 DNA 克隆和被標記了與32P-dCTP 使用頭等II 任意底漆標記的成套工具(Stratagene) 。污點雜交了8 個小時 在68.C,污點是 雜交與miR156 補全低聚核苷酸被標記與32PATP (新英格蘭Biolabs) 在40.C 在ULTRAhyb-oligo 雜交.
總核糖核酸與葉子或花卉組織如上所述被隔絕了。